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1、視診和觸診：肛門視診可在肛周皮膚上見單個或多個外口，外口常在肛周皮膚表面，凹陷或隆起，擠壓時有膿液流出，外口凸起較小者多為化膿性。外口常在肛周皮膚表面，凹陷或隆起，擠壓有膿液流出，淺部的瘺管可在皮下摸到硬的條索，由外口通向肛門。高位肛瘺位置較深，不易摸到瘺管，且外口常有多個。如肛門左、右側(cè)均有外口，應(yīng)考慮為“蹄鐵形”肛瘺，這是一種特殊類型的肛瘺，瘺管圍繞括約肌，由一側(cè)坐骨直腸窩通向?qū)?cè)，或呈半環(huán)形，如蹄鐵狀，在齒狀線附近有一個內(nèi)口，口數(shù)目較多，位于肛門左右兩側(cè)。
2、直腸指診：直腸指檢可初步了解內(nèi)口位置、有無分支及其類型，指檢時可摸到內(nèi)口硬結(jié)，有壓痛，按壓后見膿液排出。
3、肛鏡檢查：可仔細檢查齒狀線上下，注意觀察肛竇有無充血、凹陷或排膿，對可疑存在的內(nèi)口可用探針探查以明確診斷。
4、X線造影術(shù)：經(jīng)瘺管外口注入30%~40%的碘甘油或復(fù)方泛影葡胺，在X線下觀察肛管直腸瘺的部位、走向和分布。多用于高位復(fù)雜性肛管直腸瘺。
5、探針檢查：可用探針探查瘺管的行徑、方向和深淺。探針應(yīng)細而軟，從外口插人后沿管道輕輕探入，不可用力，以免探針穿破瘺管壁引起感染或假道。
6、注入美藍染料：把5％美藍溶液自瘺管外口注入瘺道內(nèi)，觀察事先放入肛管直腸內(nèi)白紗布上的染色部位以判斷內(nèi)口位置。
7、磁共振成像檢查：近年來有人分析比較磁共振成像檢查、CT和肛管腔內(nèi)超聲檢查，認為對復(fù)雜性肛瘺、蹄鐵形肛瘺和手術(shù)處理困難的病例，MRI檢查有其優(yōu)勢且準(zhǔn)確率高，臨床正確使用MRI尚可提高手術(shù)成功率并有效監(jiān)測復(fù)雜性肛瘺的治療效果。
8、Goodsall規(guī)律：在肛門中間劃一橫線，若肛瘺外口在橫線前方，瘺管常呈直型，呈放射狀分布；若外口在橫線后方，瘺管常呈彎型，內(nèi)口多在肛管后正中肛隱窩處。多數(shù)肛瘺符合上述規(guī)律。Goodsall規(guī)律對預(yù)測后方外口的肛瘺行徑相當(dāng)準(zhǔn)確，特別是在女性病人中，符合率達97％，但它對前方外口的肛瘺預(yù)測不夠準(zhǔn)確。Goodsall未認識到前方肛瘺也主要起源于前正中隱窩。